связь между йодом и кольцом в йодированном феноле

dddtt

Насколько стабильна связь между йодом и кольцом в йодированном феноле?
Нужно понять может ли отщепляться йод от меченных по тирозину белков при кипячении.

artobus

возььи меченный тирозин, покипяти, да проверь, так проще и надежней будет

dddtt

Чтобы взять меченный тирозин, его нужно пометить, а такой возможности у меня нет - нужно срочно.

vitus

не должен вроде, а так надо копаться в литературе.

Vladimirovna

нет, такой процесс (т.е. разрыв связи иод-углерод) при кипячении идти не будет
но поскольку это белок, то возможны различные процессы восстановления-окисления

olga58

помоему нуклеофильное замещение на фенолах обычно не идет - поэтому все будет ок.

dddtt

Проблема собственно в чем:
метим 125 йодом белки с помощью иодогена, от несвязавшегося йода отделяемся диализом, при электрофоретическом разделении и визуализации форезов на фосфоримиджере обнаруживается радиоактивность в низкомолекулярной области (помимо полосы белка)
Возникает вопрос - эта низкомолекулярная примесь недоочищенный йод, или йод который отвалился от белка при кипячении (кипятим кстати в присутствии меркаптоэтанола, мб дело в нем). Эксперименты с этими белками указывают именно на второе, но непонятно насколько такое возможно.

kjjff

мб вот так?
ArI + HOCH2CH2SH => ArH + HOCH2CH2SSCH2CH2OH + HI

kjjff

а какой рН при кипячении?

stat2814955

выглядит вполне правдоподобно

dddtt

8

stat2814955

хотя, надо сказать, все-таки связь именно в ароматических иодидах довольно таки прочная - все-таки сопряжение и все такое. Стоят годами в прозрачных баночках и ничего, в отличие, скажем, от иодпропана, который на следующий день уже коричнеый.
Можно проверить наличие иодид-иона, всем известно - перекись/крахмал, вряд ли органика в таком случае будет реагировать

kjjff

слабокислая, хм...
я просто подумал, что ведь ДТТ и бета-меркаптоэтанол обладают способностью восстанавливать дисульфидные связи во всех белках при слабощелочных рН, так как в этой реакции участвуют ОН(-)ионы, а в кислой среде они неактивны

sersh_2000

Меркаптоэтанол реагирует. А вы гель не отмываете перед визуализацией?

dddtt

От чего?

sersh_2000

Я имел в виду комплекс действий, направленных на фиксирование белков в геле и их окраску. По идее, при этом должны вымыться низкомолекулярные соединения, продукты реакции с меркаптоэтанолом. Если продукт не вымывается, то должен идти с фронтом. Если полоса не на фронте, то это, наверное, белки - результаты восстановления дисульфидных мостиков.

dddtt

Идет с фронтом
Отмывать не нужно как раз - эксперимент такой
Окрашивать тоже не нужно - визуализация именно по радиоактивности, чтобы вычленить наш белок среди смеси других

sersh_2000

Всё ясно
Оставить комментарий
Имя или ник:
Комментарий: